質粒是一種閉合環狀的雙鏈超螺旋 DNA 分子，廣泛應用于疫苗制備及細胞基因治療（CGT）領域，如 DNA 疫苗、裸質?；蜉d體、腺相關病毒（AAV）和慢病毒載體等。通常質粒是以大腸桿菌（ E.coli ）為宿主進行生產，最有代表性的宿主菌是由大腸桿菌 K-12 所衍生出的 DH5a、Stbl3、Top10 等菌株。在質粒的生產及純化過程可能會存在 E.coli 宿主細胞蛋白（E.coli HCP）殘留的污染，這些殘留 HCP 會給質粒后續應用帶來風險，如在體內產生免疫反應，因此要對 E.coli HCP 的殘留量進行控制。不同于常規的使用 E.coli 表達重組蛋白的工藝過程，質粒的生產純化最常用工藝是堿裂解工藝。本試劑盒所采用的抗原是基于 E.coli 堿裂解工藝過程制備的變性 E.coli HCP，同時采用堿裂解工藝 E.coli HCP 免疫動物獲得專屬抗體。本產品適用于采用堿裂解工藝提取的質粒中間品、原液及終產品的 E.coli HCP 定量檢測。 首次使用本試劑盒前建議先完成產品的適用性研究，確認樣本基質是否存在干擾以及合適的樣本檢測稀釋條件。 產品特點 1、定量范圍：1.0~250 ng/mL； 2、靈敏度：E.coli HCP檢測下限（LOD）不高于0.4ng/mL，定量下限：1.0ng/mL； 3、精密度：定量限范圍內板內、板間樣本濃度變異系數均<20%； 4、特異性：與CHO、Vero、HEK 293等宿主蛋白均無交叉反應； 產品優勢 試劑盒溯源體系完善 組分（校準品、抗體）自主制備開發，原料自主可控，試劑盒溯源體系完善； HCP制備工藝有代表性 選用具有代表性的E.coli細胞株；模擬實際樣本制備工藝； 特異性高 覆蓋率高達84%；包含絕大部分E.coli HCP（共1000多種HCP）； 操作簡單性能穩定 兩步法設計，操作簡單快捷，結果穩定 供應鏈安全 批產量大，貨期短，供貨穩定；
E.coli宿主蛋白殘留檢測試劑盒 性能指標 結果 1.線性范圍 定量范圍 1.0~250 ng/mL PASS 四參數擬合R2 >0.99 PASS 2.準確性 企業參考品偏差 RSD≤20% PASS 3.回收率 模擬樣本回收率 70%~130% PASS 4精密度 批內差 CV≤15% PASS 批間差 CV≤20% PASS 5.特異性 1μg/mL CHO，HEK 293、 Vero HCP無干擾 PASS 6.干擾性 2.5×TE緩沖液無干擾 PASS 7.定量上限 1.0 ng/mL PASS 8.定量下限 250 ng/mL PASS 9.耐用性 儀器適用性 MD SpectraMax i3x/BioTek ELx800/ Thermo Fish Multiskan TM SkyHigh PASS 10.穩定性 有效期 2~8℃保存12月 PASS
